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          移液器專題匯總

          [內容提要]:如何選擇移液器,如何保養移液器,如何正確使用和維修移液器,本文為您全面解答。

          目前,移液器已廣泛應用于生物技術實驗室、藥學和化學實驗室、環境實驗室等等。下面將為您詳細介紹移液器的相關信息:

          一、移液器的分類  

          二、移液器的工作原理

          三、移液器知名品牌

          四、移液器選購指南    

          五、移液器的使用 

          六、移液器使用注意事項

          七、移液器的維護保養

          八、移液器標稱容量與測量結果誤差允許標準

          九、各類微量移液器特點

          十、微量移液器的拆卸及安裝步驟 

          十一、微量移液器正確操作方法

          十二、微量移液器校準 

           

          一、移液器的分類

          1.氣墊式(內置)活塞移液器

          2. 外置式活塞移液器

           

          二、移液器的工作原理 TOP↑

          活塞通過彈簧的伸縮運動來實現吸液和放液。在活塞推動下,排出部分空氣,利用大氣壓吸入液體,再由活塞推動空氣排出液體。使用移液器時,配合彈簧的伸縮性特點來操作,可以很好地控制移液的速度和力度。

          三、移液器知名品牌 TOP↑

          1. 艾本德(Eppendorf)移液器:作為移液器的發明者,艾本德在移液器市場近幾年無論是在全球還是國內,都穩居。

          2. 吉爾森(GILSON)移液器:吉爾森的移液器都是不銹鋼活塞,其Pipetman系列移液器自上市以來,享譽數十年,以結實[accurate]著稱;但人體工程學元素很少,非常笨重,力氣小的人如果長時間使用頗有些痛苦。

          3. 芬蘭雷勃(Finnpipette)移液器:雷勃現在是美國熱電(Thermo Fisher)的子公司。其彩槍和白槍都是在中國生產的,采用塑料活塞,品質一般,但價格低廉,在中國市場的接受度非常高,與大龍一起是高校學生用的[much]多的產品。另外,其多道移液器性價比比較高,在中國市場接受度也很高。

          4. 芬蘭百得(BIOHIT)移液器:百得在歐洲也算得上是高檔產品,但在中國卻一直都沒能體現其高貴的血統。其Proline系列上市已久,性能中庸,現在在國內生產,也是眾多國內品牌的仿制對象。

          5.德國普蘭德(BRAND)移液器:普蘭德在國內成名已久,但一直沒有大作為——這可能與其區域代理的銷售模式和非主流的產品特點有很大關系。普蘭德的移液器用玻璃作為活塞的材質,其Transferpipette系列(灰槍和白槍),外形非常獨特,但現在已逐漸退出市場。現在普蘭德主推的是其整支滅菌的Transferpipette S系列,性價比有所提高,但外形則中規中矩,缺乏特色了。

          四、移液器選購指南   TOP↑
                                  

          1了解移液器性能

          即移液器的[accuracy]性和重復性對于絕大多數用戶而言,購買之前檢測產品性能既有難度又無必要。因此,主要還是依據制造廠商提供的技術數據。但在這里還是要說明兩點:其一,不要輕易相信賣家的口頭承諾,一定要查閱制造商提供的書面材料;其二,在全球移液器市場上影響較大的品牌,其提供的技術數據可信度更高。

          2了解移液器的可靠耐用度

          主要取決于移液器所用的材料。對于外殼,應當有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導熱性(如PVDF材質);對于活塞,目前市場上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質。不銹鋼機械性能好、壽命長,只是不太適合用于強酸強堿的移液;陶瓷則有很高的耐腐蝕性,但機械性能較差。當然,優質的材料往往意味著更高的價格,所以需要綜合考慮購買價格和壽命的因素。

          3了解移液器人體工程學設計

          主要可考慮以下幾點: ,完成一個移液循環拇指的移動距離短,意味著舒適度更高; 第二,比較相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,這是影響舒適性的關鍵,用力越少意味著長期使用造成手指損傷的風險越小;第三,裝卸吸頭,同樣是越省力越好; 第四,移液器的重量適中,過重會增加手的負擔,但過輕也往往意味著材質可能差強人意; 第五,其它的輔助設計,如殼體的磨砂設計以及指鉤設計,有助于進一步提高舒適性。SOCOREX在人體工程學方面,在全球移液器市場都處于力爭上游的位置,在以上幾點都有flawless的表現。

          五、移液器的使用 TOP↑

          1.移液器量程的調節:在調節量程時,如果要從大體積調為小體積,則按照正常的調節方法,逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時,則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證量取的[tallest[accurate度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍

          2.移液器槍頭(吸液嘴)的裝配在將槍頭(pipettetips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯誤的做法,因為這樣會導致移液槍的內部配件(如彈簧)因敲擊產生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調節旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合

          如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的對準槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過O型環,并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。

          3.移液的方法:移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態,將槍頭插入液面下23毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法:

          一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至停點排出液體,稍停片刻繼續按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。[much]后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設置量程的液體,轉移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至停點排出設置好量程的液體,繼續保持按住按鈕位于停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。

          使用步驟:

          六、移液器使用注意事項  TOP↑

          1.當移液器吸嘴有液體時切勿將移液器水平或倒置放置,以防液體流入活塞室腐蝕移液器活塞。

          2.正確使用移液器吸液、排液,以達高[accurate]度。

          3.平時檢查是否漏液的方法:

          a.吸液后在液體中停 1-3

          b.秒觀察吸頭內液面是否下降;如果液面下降首先檢查吸頭是否有問題,如有問題更換吸頭,更換吸頭后液面仍下降說明活塞組件有問題,應找專業維修人員修理。

          4.需要高溫消毒的移液器應首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后再行處理。

          5.使用完后,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。

          七、移液器的維護保養  TOP↑

          1.如液體不小心進入活塞室應及時清除污染物。

          2.移液器使用完畢后,把移液器量程調至髙至值,且將移液器垂直放置在移液器架上。

          3.根據使用頻率所有的移液器應定期用肥皂水清洗或用 60 %的異丙醇消毒,再用雙蒸水清洗并晾干。

          4.避免放在溫度較高處以防變形致漏液或不準。

          八、移液器標稱容量與測量結果誤差允許標準  TOP↑

          1.“標稱量程”其實是一個完全錯誤的講法,因為所謂的“量程”應該是一個范圍內的事情,而在移液器的相關規程或標準中,并沒有“標稱量程”這種提及。我們注意到,在移液器相關的計算中,常常使用的一個詞是“標稱容量”,其定義是一定量程范圍內的髙至量程即稱之為“標稱容量”。因此,根據該定義的描述,可知,所謂的“標稱容量”其實是一個容量“點”,而非一段容量“范圍”,因此,使用“標稱容量”的說法來代替“標稱量程”的說法,想染更為貼切。以上我們所討論的是對具有一定量程范圍的移液器的“標稱容量”定義,那么,對于沒有一定容量范圍的移液器,也就是固定容量的移液器,其標稱容量是什么呢?很顯然,如果是固定容量的移液器,其標稱容量及時其固定容量。我們列舉兩個簡單的例子以求更為明了。如可變量程范圍是0.1-3ul的移液器,其標稱容量是3ul;如國定容量100ml的移液器,其標稱容量是100ml 

          2.對于可變量程移液器的測量結果,其誤差的要求如何呢?這里,就要應用到“標稱容量”這個詞。標稱容量的定義前面已經提到,因此,對一支可變量程的移液器,則選擇其有效量程范圍內的髙至量程作為其標稱容量。注意,這里我們說的是“有效”量程,所謂有效量程既是移液器的生產商所宣稱的量程。因為,現在市場上銷售的多種移液器,其容量可調節的范圍,往往都要超出其生產商宣稱的范圍。如10-100ul的移液器,其有效量程是10-100ul,但實際上,其低至值可以調節到7ul左右,髙至值也可以調節到110ul左右,但這個范圍7-110ul并不是廠家所宣稱的該只移液器的量程,不是該只移液器的有效量程。因此,該只移液器的標稱容量是100ul,而不是110ul

          對可變量程移液器測量結果的誤差標準,是以其標稱容量來對比上述表1或表2來知道其誤差范圍的。如10-100ulA型移液器,對比表1,同時因其標稱容量是100ul,查表1可知,其測量結果的髙至系統允差是+/-0.8、髙至隨機誤差是+/-0.3

          九、各類微量移液器特點     TOP↑

          1.整支可消毒移液器

          可顯示4位數字;整支移液器可高溫高壓消毒;具有獨特的單操縱桿結構;設計有容量調節旋鈕安全鎖,避免移液過程體積發生變化;下端細長,便于從窄長容器中移取液體;小量程(小于100~d)移液器為金屬活塞;大量程(大于100g1)移液器為夾芯陶瓷活塞,耐磨、抗腐蝕;可根據按鈕顏色選擇適配標準吸嘴;可進行三點校正。

          2.半支可消毒移液器

          移液器上下端可拆離,下端部分可高溫高壓消毒;外殼采用新型抗UV材料;多道可調移液器,分為八道和十二道兩類;尖端的橡膠環能確保緊密結合。

          3.電動移液器

          具有三種操作模式(PIPDISFIX);液晶數字可顯示吸取液量、連續加樣次數和加樣速度等多項指標;馬達驅動加樣,可充電;具有分配功能,[much]多可進行20次分配;可直接改變取液量,方便快捷;可直接測出余液量;可進行編程。

          4.PCR專用移液器

          主要用于PCR等精密實驗;具有特殊的活塞吸嘴,確保無交叉污染;非空氣活塞推動原理,手接觸溫度、液體的黏滯度等因素不會影響其[accurate度;具有獨特的單操縱桿結構;可實行五點校正。

          十、微量移液器的拆卸及安裝步驟   TOP↑

          1.微量移液器的安裝步驟:

          1)把活塞和彈簧裝入移液器下半部。

          2)把活塞固定器放在活塞上面,并把它按進下半部分的溝槽。

          3)把下半部旋緊到上半部手柄(不要使用小工具)

          4)按下脫卸按鈕,裝上脫卸筒套。

          2.微量移液器的拆卸步驟:

          1)往下按緊脫卸按鈕,用力拉出脫卸套筒。可使用隨移液器提供的小工具對下半支進行拆卸。

          2)向左旋轉下半支移液器,使其脫離把手。

          3)按活塞固定器并移走(活塞有可能受彈簧彈力作用彈出)

          4)卸下活塞和彈簧。

          單道移液器拆卸方法:

          多道移液器拆卸方法:

          十一、微量移液器正確操作方法  TOP↑

          1)按到檔,垂直進入液面幾毫米。

          2.緩慢松開控制按鈕,否則液體進入吸頭過速會導致液體倒吸人移液器內部吸人體積減少。

          3)打出液體時貼壁并有一定角度,先按到檔,稍微停頓1s后,待剩余液體聚集后,再按到第二檔將剩余液體全部壓出。

          黏稠或易揮發液體的移取

          在移取黏稠或易揮發的液體時,很容易導致體積誤差較大。為了提高移液[accuracy]性,建議采取以下方法:

          1)移液前先用液體預濕吸頭內部,即反復吸打液體幾次使吸頭預濕,吸液或排出液體時理想地多停留幾秒。尤其對于移取體積大的液體(1000~1),建議將吸頭預濕后再移取。

          2)采用反相移液法:吸液時按到檔,慢慢松開控制按鈕,打液時按到第二檔即可,部分液體殘留在吸頭內。

          常見的錯誤操作

          1)吸液時,移液器本身傾斜,導致移液不[accuracy](應該垂直吸液,慢吸慢放)

          2)裝配吸頭時,用力過猛,導致吸頭難以脫卸(無需用力過猛,選擇與移液器匹配的吸頭)

          3)平放帶有殘余液體吸頭的移液器(應將移液器掛在移液器架上)

          4)用大量程的移液器移取小體積樣品(應該選擇合適量程范圍的移液器)

          5)直接按到第二檔吸液(應該按照上述標準方法操作)

          6)使用丙酮或強腐蝕性的液體清洗移液器(應該參照正確清洗方法操作)

          十二、微量移液器校準  TOP↑

          1.校準的基本操作條件

          操作室:獨立房間,顯示溫度和濕度狀態。

          溫度控制:1530~C(±05)

          濕度控制:60%~90%。

          工作臺面:防震、防塵、遠離熱源、無陽光直射。

          天平:0000 01g精密分析天平(小數點后5),每年需由廠家進行校準。

          防蒸發裝置:Eppendorf提供的濕度阱,防止稱量液體的揮發。

          測試介質:雙蒸水,每4h更換一次,批次更換周期不大于2周。

          2.操作步驟

          1)同溫化處理:校正前,所有移液器及校正介質(工作臺、天平、雙蒸水等)置于相同操作間4h,以確保它們具有相同的溫度。

          2)內外部清洗。

          3)潤滑活塞。

          4)校準:采用三點校準法,即根據移液器量程范圍,選取低達量程、中間值和[tallest量程三點分別測試10次,各個測試點取其平均值,計算其[accuracy]度(accuracy)和[accurate度(precision),評價標準符合DIN 12650要求。

          5)校準報告:可根據客戶需求提供計算機打印的標準報告或PICASO校正報告,符合ISODINASTM相關標準。

           

          《移液器專題》由上海巴玖整理,轉截請說明。

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