移液器校準方法談
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當前針對移液器計量結果的檢測、驗證，主流或主要的方法是采用衡量法！關于這一點，我們上海巴玖實業有限公司針對我們的客戶進行過講解，絕大多數都是選擇這一方法——也被稱之為“稱重法”。之所以被通稱為“稱重法”是因為該方法的原理是通過天平對移液器計量的一定容量的液體進行稱重，并以此數據為依據從而推斷出移液器計量結果的實際值——即容量。
具體操作步驟：
1、準備超純水、萬分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十萬分之一的天平）、溫濕度計、恒溫室，還需準備一個小口容器，防止水分揮發。
2、按移液器總量程的100%、50%、10%分別進行第三和第四步。
3、吸頭要反復吸取超純水三次后，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數據穩定讀取天平數值，同時記錄溫度。重復10次。
4、將測量的數據用iso8655中的計算公式計算獲得對應溫度下的體積，取平均值。
5、根據三個測量點的偏差，用移液器專用的校正扳手通過移液器的校正窗進行調整。
6、重復3、4步，直至偏差在ISO8655的要求內為止。
從這一方法的原理顯然可以看出，“衡量法（或稱重法）“校準過程極容易受到如下因素的影響。
1 溫度，因為分光光度法同樣需要使用到液體即溶劑，一定質量量的溶劑，其容積同樣受到溫度的影響而變化。但如果在用戶所在的場所對移液器進行校準，則此影響 可以不計，因為某一個具體用戶所在的場所內的溫度變化，相對來說是固定的，那么這種由溫度帶來的影響，同樣也會存在于用戶實際工作中，因此這兩者是可以相 互抵消的（上海巴玖實業有限公司備注：目前在該領域較為成熟的技術來自于美國一家實驗室）；
2 氣壓，同溫度帶來的影響一樣，由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的；
3 操作人員的操作習慣帶來的影響，因為分光光度法是可以被直接在終端用戶使用場所應用的一種移液器校準方法，其操作方法相對于傳統的衡量法（或稱重法）更為 簡單、可靠，因此完全可由移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進行校準。這樣操作者的操作習慣在校準過程中表現出來的差異同樣存在與今后 的使用過程中，這兩者之間的差異也可以相互抵消的；
4 環境濕度，因為分光光度法不是對移液器排出的溶劑進行稱量，而是對溶劑中所包含的特殊物質的光波進行測量，同時這種特殊物質是不可揮發的，因此在整個測試 過程中，其已經通過移液器排出的溶劑，無論其質量如何變化，但結果是不會受到影響的，也就是不需要對環境的干濕度進行控制。
因為終端用 戶處的環境，是千差萬別的，有的甚至高于這些專業的實驗室，但更多的則是遠遠低于這些專業的實驗室。因此常常遇到在專業的實驗室里校準合格的移液器，當終 端用戶在自己的工作場所重新校準時，卻發現其結果并不理想。這不一定是移液器質量出現問題，常常是因為校準的場所的環境改變了、校準的人員改變了，從而上 述影響校準結果的各種因素也改變了。而解決這一問題的[much]有效的辦法就是直接去到終端用戶的實際使用場所去對用戶的移液器進行校準，這樣得到的校準結果對特 定的用戶來說才是[much]真實的！
我們當然可以將專業的實驗室的儀器、設備，如高精度電子天平、專業技術人員、環境控制的等各種設備搬遷至終端用戶處進行校準，但這顯然是不經濟的，也是行不通的。因為有些儀器，比如高精度電子天平，一旦離開了原本固定的使用場所，是需要重新校準合格才可以使用的。
全新的移液器校準方法——分光光度法。
分光光度法校準原理是將混合有特殊物質的液體——即溶劑(英文solution)，通過移液器量取后注入目標容器，然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后，再對剩余的特定的波長的光進行測量，從而由此計算出移液器實際吸取和排出的液體——即溶劑。
當然， 目前分光光度法作為一種針對移液器校準的新的應用方法還是剛剛興起，在國外也只有少數研究機構或實驗室在使用，在我國目前僅停留在理論層面的評估上，并沒 有在實際中推廣、應用。因此根據我們上海巴玖實業有限公司多年的行業經驗認為，這種新型的針對移液器校準的方法，在不久的將來，將會得到更多用戶的肯定與承認。
兩種方法都是可以行的，其實分光光度法和傳統的重量測定法相結合，能夠更加[accurate]的校準移液器的偏差，有效減少兩個校準方法中測量因素對校準結果帶來的偏差。
